菌种保藏的方法

摘要： 菌苗主要指的是由我国特定的菌种保藏中心提供的成品菌株，它们被保存在液氮状态下，封装在安瓿管里。根据国家规定，企业在生产时必须从指定的菌种保藏中心获取菌种，不可使用外来菌种。菌种的保...

菌苗主要指的是由我国特定的菌种保藏中心提供的成品菌株，它们被保存在液氮状态下，封装在安瓿管里。根据国家规定，企业在生产时必须从指定的菌种保藏中心获取菌种，不可使用外来菌种。

菌种的保藏基于其生理和生物化学特性，在人为创造的环境下最大限度地降低微生物细胞的新陈代谢强度，使细胞近乎休眠状态，生长繁殖受到抑制但保持存活，以此来减少菌种的变异率。低温、干燥、缺氧和营养匮乏等条件都能有效抑制微生物的代谢活动。低温、干燥和真空是菌种保藏的关键手段。选择保藏方法时，既要考虑能否长久保持菌种原有特性，也要兼顾经济性和便捷性。实践中，常结合多种条件以提高保藏效果。

保藏菌种的过程包括：选取典型纯菌体；确定适合保藏的菌体形态；选择最适宜的保藏方法；定期检查保藏菌种，观察是否发生变化，如有变故则调整保藏方法，并在保藏周期结束后及时转接培养。

一种常用的保藏方法是琼脂斜面低温保存法。将常用的菌种接种到斜面（某些特殊菌种可用液体培养基），按要求温度和时间培养，成熟后用封口纸包裹，为减少水分蒸发，可用橡胶塞替换棉塞，然后置于约4℃的冰箱中保藏。每隔2至3个月进行一次转接，重复保藏过程。对于细菌、酵母和霉菌等，这种方法较为适用，简单且易于推广，但储藏期相对较短，频繁转接可能导致变异和污染。

另一种方法是液体石蜡保存法，通过石蜡隔绝空气，降低菌种生理活动，防止水分蒸发，延长保藏时间。此法适用于部分霉菌、酵母和放线菌，对细菌保藏效果较差。操作时，需确保使用新鲜培养物接种，并注意控制石蜡液面高度，过高或过低都不利于保藏。

在整个保藏过程中，必须定期检查冰箱温度、湿度以及菌种管的密封情况，确保菌种的保存质量。使用菌种前，要仔细核对菌种信息，确认其特性和纯度。此外，培养液应低糖，以避免产酸过多影响菌种存活。需要注意的是，铜绿假单胞菌不宜用低温冰箱储存，因其容易自溶死亡。